Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
сульфат сульфата вода aureus
ФСО NCTC 7447
CIP 53.156
ATCC 6538 P
Эритромицина Эритромици Метанол (см. 8,0 Klebsiella D; 7.0 35-37
эстолат на фСо частные статьи) pneumoniae C; 7.0 35-37
Эритромицина Метанол NCTC 7427
этилсукцинат CIP 53.153
Эритромицина ATCC 10031
стеарат Staphylococcus
aureus
NCTC 7447
CIP 53.156
ATCC 6538 P
Следующий раздел дается для информационных и методических целей; он не является обязательной частью общего метода.
РЕКОМЕНДУЕМЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ
В нижеследующем тексте приводятся рекомендуемые микроорганизмы и условия их применения. Могут также использоваться и другие микроорганизмы при условии, что показана их чувствительность к испытуемому антибиотику и они могут использоваться в подходящей среде и при подходящих значениях температуры и рН. Концентрации используемых растворов должны быть выбраны таким образом, чтобы в условиях испытания обеспечивалось наличие линейной зависимости между логарифмом дозы и реакцией.
Приготовление посевного материала:
Bacillus cereus var mycoides; Bacillus subtilis; Bacillus pumilus. Суспензия спор микроорганизмов, используемая в качестве посевного материала, готовится следующим образом.
Микроорганизм выращивается при 35-37°С в течение 7 дней на поверхности подходящей среды, к которой добавлен сульфат марганца (II) в концентрации 0,001 г/л. Выращенную культуру, состоящую в основном из спор, смывают стерильной водой. Нагревают суспензию при 70 °С 30 минут и разбавляют для получения подходящей концентрации спор, обычно от 10 х 106 до 100 х 106 в мл. Суспензия спор может храниться в течение продолжительного времени при температуре, не превышающей 4°С.
Суспензия спор также может быть приготовлена путем культивирования организмов в среде С при 26°С в течение 4-6 дней с последующим добавлением в асептических условиях сульфата марганца в количестве, достаточном для получения концентрации 0,001 г/л и инкубированием в течение 48 часов. Суспензию микроскопируют для подтверждения спорообразования (около 80%) и центрифугируют. Осадок ресуспендируют в стерильной воде, получая концентрацию спор от 10 х 106 до 100 х 106 в миллилитре, после чего нагревают при 70°С в течение 30 минут. Суспензию хранят при температуре, не превышающей 4°С.
Bordetella bronchiseptica. Микрорганизм выращивают на среде В при 35-37°С в течение 16-18 ч. Выращенную культуру смывают стерильной водой и разбавляют до требуемой степени мутности.
Staphylococcus aureus; Klebsiella pneumoniae; Escherichia coli; Micrococcus flavus; Staphylococcus epidermidis. Посевной материал готовят по методу, описанному выше для В. bronchiseptica, но с использованием среды А и доведением степени мутности до значения, дающего, в зависимости от метода, удовлетворительную зависимость реакции от дозы в турбидиметрическом определении или четкие зоны ингибирования подходящего диаметра.
Saccharomyces cerevisiae; Candida tropicalis. Тест-культуры выращивают на среде F при 30-37°С 24 часа. Смывают выращенную культуру стерильным раствором натрия хлорида с концентрацией 9 г/л. Разбавляют до требуемой степени мутности тем же раствором.
# Допустимо использование следующих методов приготовления посевного материала:
Candida utilis ЛИА-01
Выращивают в пробирках со скошенной средой № 3 в течение 48 часов при температуре (30 ± 1)°С.
Staphylococcus aureus
Выращивают в пробирках со скошенной средой № 1 в течение 24 часов при температуре (36 ± 1)°С.
Bordetella bronchiseptica
Выращивают в пробирках со скошенной средой № 1. Продолжительность инкубации 30-36 часов при температуре (36 ± 1)°С.
Pseudomonas aeruginosa NCTC 2134
Выращивают на мясо-пептонном бульоне рН 7,2-7,4 при температуре (36 ± 1 )°С в течение 18-20 часов.
Bacillus pumilus, NCTC 8241, Bacillus subtilis ATCC 6633, Bacillus cereus var.mycoides HB, Bacillus cereus var.mycoides 537
Для получения суспензии спор тест-микроорганизмы выращивают на скошенной среде в пробирках (среда № 1 для В. subtilis var.L2, B.pumilus NCTC8241,
В. subtilis ATCC 6633, B.cereus var.mycoides HB; среда № 2 для B.cereus var.mycoides 537), при температуре (36 ± 1)°C 18-20 часов. Культуру, выращенную в пробирках, смывают 5-10 мл стерильного раствора натрия хлорида 0,9 %, засевают ею несколько матрацев с 300 мл питательной среды со скошенной поверхностью, (среда № 4 для B.pumilus, В. cereus var.mycoides 537; среда № 5 для В. subtilis ATCC 6633, B.cereus var.mycoides HB). На матрацах посевы инкубируют при температуре (36 ± 1 )°С в течение 5-7 суток. В процессе выращивания проводят микроскопический контроль культуры. Культуру, содержащую 80-90 % спор, смывают стерильной дистиллированной водой.
